Az RPA egy a sok izotermikus nukleinsav-amplifikációs módszer közül, amelyeket molekuláris diagnosztikai technikaként kell kifejleszteni, gyakran azzal a céllal, hogy egyszerűsítsék a laboratóriumi műszereket a PCR -hoz képest. Más izotermikus amplifikációs technikák részleges listája a LAMP, NASBA, helikáz-függő amplifikációt (HDA) és nicking enzim amplifikációs reakciót (NEAR) tartalmazza. A technikák különböznek a primer elrendezésének és a reakció mechanizmusának sajátosságaiban, és bizonyos esetekben (például az RPA) két vagy több enzim koktélokat használnak. Hasonlóan az RPA-hoz, ezeknek a technikáknak sokasága gyors amplitúdókat kínál, egyszerűsített műszerezés lehetőségével, és beszámoltak a tisztítatlan mintákban ismert anyagokkal szembeni rezisztenciaról, amelyekről ismert, hogy gátolják PCR. Az erősítési időt tiszteletben tartva, a modern hőmérsékleti rámpákkal rendelkező modern hőciklusok kevesebb mint 30 percre csökkenthetik a PCR amplifikációs időt, különösen rövid amplikonok esetében, amelyeknél a hagyományos háromhőmérsékleti protokoll helyett kettős hőmérsékleti ciklus kerül alkalmazásra. Ugyancsak a minta előkészítésének igényeit (ideértve a DNA vagy RNA lízisét és extrahálását, ha szükséges) figyelembe kell venni a technikához jellemző tipikus idő és komplexitás részeként. Ezek a követelmények a technikától függően változnak, a konkrét célkitűzés és a minta típusa mellett.
Image 249A | A rekombináns sejtek szkrínelésében részt vevő molekuláris mechanizmus vázlatos ábrázolása Dylan2106 / Public domain | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Blue_white_assay_Ecoli.jpg) from Wikimedia Commons
Szerző : Milos Pawlowski
Megjegyzések
Megjegyzés küldése