Az előre és a fordított primereket nagy sűrűségű kovalensen hozzákapcsolják a tárgylemezhez az áramlási cellában. Az alapok és a hordozó sablonjainak aránya határozza meg az amplifikált klaszterek felületi sűrűségét. Az áramlási cellát a polimeráz-alapú meghosszabbítás reagenseinek tesszük ki, és az alapozás a ligált fragmentum szabad / disztális végeként "áthidalja" a felületen lévő komplementer oligóval. Az ismételt denaturáció és kiterjesztés a DNA lokalizált amplifikációját eredményezi DNA fragmensek egymástól elkülönített helyek millióiban az áramlási cella felületén. A szilárd fázisú amplifikáció 100–200 millió térben elválasztott sabloncsoportot hoz létre, szabad végeket biztosítva, amelyekhez azután egy univerzális szekvenáló primert hibridizálnak a szekvenálási reakció megindításához. Ezt a technológiát 1997-ben szabadalmi bejelentés céljából nyújtották be a Glaxo-Welcome's Genfi Biológiai Orvosi Kutatóintézetétől (GBRI), Pascal Mayer, Eric Kawashima és Laurent Farinelli, és 1998-ban először nyilvánosan bemutatták. 1994-ben Adams és Kron szabadalom egy hasonló, de nem klonális, felszíni amplifikációs művelettel, amelyet "híd amplifikációnak" neveztek, és amelyet Church és Mitra 1997-ben adaptált a klonális amplifikációra.
Image 155A | A PacBio SMRT technológia és az Oxford Nanopore változatlanul használhatja a DNA -ot a metilezéshez. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) a Wikimedia Commonsból
Szerző : Yavor Mendel
Megjegyzések
Megjegyzés küldése